本报上海10月25日电第二军医大学微生物教研室主任戚中田教授等科研人员,经过4年多的艰苦努力,在国际上首次构建了两端非编码区完整、开放读码框架正确的庚型肝炎病毒全长基因组单个完整克隆。该基因组长度为9373个碱基,能够在猕猴体内表达病毒蛋白质及形成病毒样颗粒,实验感染的动物血液中可出现持续性庚型肝炎病毒血症,并可在猕猴传代感染。日前,该项成果获得国家发明专利授权证书。这是该课题组继丙型肝炎病毒研究课题获国家科技进步二等奖后,在肝炎相关研究领域取得的重要进展。
据悉,庚型肝炎病毒是美国科学家1995年发现的一种与人类肝炎相关的新病毒,被认为是人类不明原因肝炎的主要致病因子。目前,该病毒不能在体外人工培养,要研究庚型肝炎病毒以及致病性与免疫性,都必须依靠庚型肝炎病毒全基因组。据文献检索,国外科学家到目前为止,只克隆出庚型肝炎病毒基因片段,没有获得完整的庚型肝炎病毒全长基因。
1986年,戚中田教授赴美学习病毒基因工程,1991年,他又到日本进行客座研究。他先后在国际上首次构建成功中国丙肝病毒基因文库,率先研制成功新一代丙肝诊断试剂盒。1996年,戚中田教授率领课题组,在国家杰出青年基金及上海市科技发展基金的资助下,进行庚型肝炎病毒基因组的研究。他们采用重叠延伸多聚酶链反应拼接一连接法,经过4年多的不懈努力,终于成功克隆了庚型肝炎病毒全长基因组,并对重要的病毒包膜蛋白基因在原核细胞、真核细胞及昆虫细胞系统进行表达。
据专家介绍,庚型肝炎病毒主要经血液传播,在我国人群的感染率为2%,病毒抗体携带率约为3.5%。因此,加强对庚型肝炎病毒的研究,具有重要的基础研究价值和临床实际意义。该病毒全基因组单个完整克隆的成功构建及其感染性的实验研究,对阐明该病毒的结构与功能及诊断、预防和治疗有很大的促进作用。这项研究成果为解释庚型肝炎病毒的致病性、发展诊断试剂、设计疫苗及合成多肽药物等都将提供极有价值的依据。